新冠病毒是这样被“揪出来”的

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Staff正在进行开盖和核酸提取。

"这是一个“零距离”接触病毒的地方。整个实验室完全封闭,房间处于负压状态。我们喜欢用“三种流动”来描述它,即人员、货物和空气的单向流动,以确保里面的污染物不会泄漏出去并造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林建国说,“这里”是指P3实验室。

广东省第二人民医院每天对新诊断的肺炎进行400多次核酸检测。让我们揭开P3省第二医学博士实验室的神秘面纱,看看新型冠状病毒是如何被“拉出”的。

文,涂/广州日报全媒体记者何通讯员

核酸检测是新诊断肺炎诊断的“金标”,检测过程中的每一个环节都一丝不苟,不能马虎。

在操作中,实验者需要在样品前“逐个打开盖子,打开盖子进行样品添加和核酸提取”。这无疑是与“病毒”的直接对抗。林建国指出,实验室中的检测过程可分为五个步骤:样品进入“转移窗口”灭活处理打开盖子进行样品添加和核酸提取扩增反应判断结果高压灭菌。

1。样本进入实验室。所收集的测试样本,如咽喉拭子或肛门拭子,在进入P3实验室之前,必须进入一个特殊的窗口“转移窗口”,该窗口也被称为空气锁。该转移窗口有一个不能同时打开的双门,以确保样品转移过程中引入的空气被隔离在双门内,并且实验室外的环境不受污染。

2。检测前停用。样品在56℃水浴中灭活半小时,使病毒蛋白不再具有生理活性,失去感染、致病和繁殖能力。测试样品时相对安全,但病毒蛋白的基因序列不受影响。

3。进行开盖和核酸提取。广东省第二人民医院检验科副主任技师胡良山是第一个进入P3负压实验室完成设备调试、程序设置、试剂试用等前期准备工作的人。

据她介绍,在标本处理室,当实验者拿到灭活的样本时,第一个动作是摇动,试着让拭子上的病毒在培养基溶液中洗脱,然后让它静置5分钟沉淀。下一步是打开盖子并添加样本,这必须手动完成,并且需要两个人高度合作。一个人拧开样品罐的盖子,另一个人拿着微量移液管吸取样品罐中的微量溶液,并将其放入另一个提取管中。一个样品对应一个提取管,然后拧上管盖。

这样,每次实验者面对面“撕开”病毒时,必须从瓶盖中取出400多份样本并转移400多次。

"在打开盖子进行样品转移的过程中,病毒很容易暴露在实验室的空气中。它离我们很近,几乎与我们没有任何联系。”胡良山说,“当打开盖子添加样本时,手拿着微量移液器常常因为戴着双手套而显得笨拙,但它必须小心。再加上眼罩、面罩和生物安全柜玻璃窗的三重屏障,所有动作都显得缓慢,手因疲劳而不时抖动,通常左手握着右手来完成样品添加。”

人工提取核酸的步骤更加复杂,这考验了实验者的耐心和谨慎。

"核酸提取可以通过仪器来辅助,但是由于需要比较,通常需要手动操作,这需要重复离心、试剂添加、洗涤等10多个步骤,其中打开管盖的操作超过7次,并且需要大约50分钟来完成人工核酸提取。"胡梁山说:

4。在45个扩增反应循环后绘制荧光曲线。提取的核酸被送到核酸检测室,仪器即将安装。将提取的核酸加入扩增试剂中,进行逆转录聚合酶链反应

确保检测质量的措施始于实验室之前。样品采集人员上岗前必须经过严格的培训和考核。每个移动过程都必须按照规定进行。样品护送必须由专门人员运送到实验室。对于可疑样品,选择不同的试剂进行审查,以防止“假阴性”。在每一批实验中,将随机插入三个以上的空白对照,并对阳性样本的病毒基因进行测序和比较,以防止“假阳性”;测试后,定期随机抽取测试后的样本,送到第三方实验室进行测试,并对数据进行比较和分析。

在P3实验室工作是什么感觉?

病毒核酸的检测,安全是重中之重,尤其是工作人员的安全,中间防护服穿脱一步不能少。

首先,在清洗区穿上中间防护服-通过缓冲室进入实验室的负压工作室,在此进行标本处理、核酸提取和检测-完成后对空间和表面进行消毒,依次脱下防护服-在淋浴室换衣服,返回清洗区。

广东省第二人民医院P3实验室目前有21人,每天三班制。为了满足特殊流行期的检测需要,缩短检测时间,在原有队伍的基础上,从风湿科、血液学科等科室的实验室抽调了额外的人员。超过70%的“侦察兵”检测团队拥有硕士或以上学位,并且接受过分子生物学培训,拥有聚合酶链反应许可证。

根据《新型冠状病毒诊疗方案》和生物安全要求,检测人员应在P3实验室负压密闭空间穿戴三级防护装备,5小时内不得进食或饮水。他们甚至应该穿成人尿布来满足上厕所的需要。还应随时克服负压差和设备紧张引起的头晕、呕吐等症状。

不仅如此,检查员必须克服他们的心理恐惧。咽拭子样本是从疑似病人的鼻咽采集的,可能含有更多新的冠状病毒。当检查员从采样罐中取出样本时,病毒很容易在这样密封的环境中通过空气传播。

"他们不同于病房里打架的医务人员。他们每天都在实验室里与病毒密切接触,是别人看不见的“前线”广东省第二人民医院P3实验室主任林建国说。